二磷酸腺苷(ADP)含量試劑盒HPLC法
二磷酸腺苷(ADP)含量試劑盒HPLC法
規格 : 50T/100T
測試方法:高效液相色譜法/HPLC
測定意義
二磷酸腺苷(ADP)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是描述細胞能量代謝狀態的主要參數。測定ADP含量并且計算能荷,能夠反映能量代謝狀態。當一摩爾ATP分子的磷酸根水解斷裂時,會產生一摩爾二磷酸腺苷分子,一摩爾磷酸根(Pi),并釋放出7.3千卡(kcal)的能量。ADP存在于血小板細胞內的高密度顆粒內,當血小板發生凝聚反應時被釋放,ADP通過血小板上的ADP受體對血小板的形狀及生物學行為產生影響,進一步加速血小板的凝聚過程。
測定原理
ADP在254 nm下有吸收峰,可以利用高效液相色譜法測定其含量。
高效液相色譜法簡介:
高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography HPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術應用 。
高效液相色譜法具有“四高一廣”的特點:
①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。
②高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小于1小時。
③高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到很好的分離效果,比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
④高靈敏度:紫外檢測器可達0.01ng,進樣量在μL數量級。
⑤應用范圍廣:百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析,顯示出優勢。
⑥柱子可反復使用:用一根柱子可分離不同化合物
⑦樣品量少、容易回收:樣品經過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。
此外高效液相色譜還有色譜柱可反復使用、樣品不被破壞、易回收等優點。
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